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植物基因组DNA快速提取试剂盒(N1191-N1192-N1193)

促销: 485.00~1680.00
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N1191(50次) N1192(100次) N1193(200次)

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产品组分
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● 漂洗液PE 初次使用前用无水乙醇按1: 3 稀释,即含75%乙醇。

● 客户自备试剂

   无水乙醇

   巯基乙醇 

   氯仿(或酚:氯仿/1 :1)


产品说明

本产品可用于拟南芥、烟草、水稻等植物样本的基因

纯化。纯化原理是利用硅胶膜柱可逆吸附体系中的

DNA,经漂洗液清洗除去蛋白质、脂质以及多

纯化液洗脱获得基因组DNA。一次可从不超过100

材料中提取到 2-20       μg  的高纯度基因组

OD260/OD280=1.7-1.9),此基因组DNA 可直接

 酶切等后续实验。

 

质量控制

纯化的基因组 DNA 质量通过限制性酶切和单拷

 

保存条件

RNase 保存于-20℃。其他的室温保存

 

注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

● 漂洗液PE 第一次使用前请按瓶上标签加入3 倍体积的无水乙醇,即15   ml 漂洗液PE 加入45   ml 无水乙醇,30   ml 漂洗液PE

  加入90 ml 无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。

● 缓冲液GPL 室温保存可能会有沉淀产生,在56℃加热溶解,待恢复室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA 纯化效率。

● 应尽量使用新鲜的实验材料,确保提取的基因组DNA 不被降解。不能立刻提取基因组DNA  的实验材料应尽快置于液氮或-70℃ 

  冰箱中保存并避免反复冻融。

● 使用液氮研磨组织材料时,应随时加入液氮,确保提取的基因组DNA 不被降解。

● 基因组DNA 需长期保存时,建议使用纯化液TE 。用无菌的离心管分装后保存于-20 ℃或-80 ℃。

● 所有离心步骤均为室温下进行。 

● 请严格按照操作步骤操作。

 

操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1  取植物新鲜组织约100 mg 或干重组织约30 mg,加入液氮充分研磨。

2  将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 μl 65℃预热缓冲液GPL 的离心管中(实验前在预热的GPL 中加入巯基乙醇,使其终

   浓度为0.1% ),加入1 μl RNase,迅速颠倒混匀后,将离心管放在65℃水浴20 min,水浴过程中颠倒离心管以混匀样品。

3  加入700 μl 氯仿,充分混匀,12,000 rpm  (~13,400 ×g )离心5 min 。

   ● 如果是提取富含多酚或淀粉的植物组织,可在第3 步前,用酚:氯仿/1 :1 进行等体积抽提。

4  小心将上一步所得上层水相转入一个新的离心管中,加入等体积缓冲液GPD,充分混匀。

5  将混匀的液体转入纯化柱,静置1 min,12,000 rpm 离心30 sec,弃滤液。(吸附柱容积为700 μl 左右,可分次加入离心。)

6  向纯化柱中加入500 μl 去蛋白液PS。12,000 rpm 离心30 sec,弃滤液。

7  向纯化柱中加入500 μl 漂洗液PE。12,000 rpm 离心30 sec,弃滤液。

8  重复步骤7,向纯化柱中加入500 μl 漂洗液PE。12,000 rpm 离心30 sec,弃滤液。

9  离心纯化柱,12,000 rpm 离心2 min,以彻底去除纯化柱中残留的液体。

   ● 此步骤的作用是去除残留乙醇,避免影响后续的酶促反应(PCR 或酶切)。同时利于基因组DNA 充分溶解。

10  将纯化柱置于新的1.5 ml 离心管中。向纯化柱中央处,悬空滴加40-100μl 纯化液TE 。室温放置2 min 。12,000 rpm 离心2 min,

   管底即为高纯度基因组DNA。-20℃保存。

  ● 纯化液TE 可用去离子水代替,但其pH 需为8.0-8.5 。

  ● 对纯化液TE 60℃预热,会提高基因组DNA 的产量。


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