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PCR产物及DNA片段纯化试剂盒(N1091-N1092-N1093)

促销: 280.00~945.00
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N1091(50次) N1092(100次) N1093(200次)

PCR产物及DNA片段纯化试剂盒

 

产品组分

 

货号

N1091

50次)

N1092

100次)

N1093

200次)

溶液BD

20 ml

40 ml

80 ml

溶液PE

15 ml

15 ml×2

20 ml×3

溶液Eluent

2.5 ml

5 ml

10 ml

DNA纯化柱

50

100

200

说明书

1

1

1


溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。

溶液BD中含有变性剂,请不要直接接触皮肤。

上述产品组分均可单独购买,详见产品索引。


产品说明

本产品采用传统的硅胶柱膜吸附技术,用于从PCR或其他各种酶促反应液中纯化DNA片段(50 bp-10 kb)。其纯化原理是硅胶膜柱高效可逆地吸附体系中的DNA片段(高盐、低pH值),同时去除酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,被吸附的DNA再在低盐、高pH值条件下被洗脱纯化。一次可回收30μg高纯度DNA片段,此DNA片段可直接用于各种酶促反应等。

 

质量控制
PCR扩增产物中纯化50 bp1,000 bpDNA片段。

 

保存条件

室温保存2年。

 

注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

●  溶液PE第一次使用前请按瓶上标签加入4倍体积的无水乙醇,即15 ml溶液PE中加入60 ml无水乙醇,20 ml溶液PE中加入80 ml无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。

本试剂盒适用于无选择性的回收体系中所有的DNA 片段。如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,建议选择凝胶回收试剂盒。

本试剂盒纯化柱的DNA吸附能力强。但如果DNA浓度小,或DNA初始量少,回收率将会偏低。

溶液Eluent10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA片段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。

为了保证回收效率,请不要使用未调整pH值的超纯水洗脱目的片段。

请严格按照操作步骤操作。


操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD,混合均匀。

将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min

    若溶液体积大于纯化柱容积(700 μl),可分两次加入。

3  12,000 rpm离心1min,弃滤液。

    此时DNA片段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。

加入500 µl溶液PE12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。

    溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。

    此步骤的作用是将硅胶膜上吸附的蛋白、盐等杂质洗脱,以获得高质量DNA片段。

加入500 µl溶液PE12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。

6  12,000 rpm离心3min,以彻底去除纯化柱中的液体。

    此步骤的作用是去除残留乙醇,避免影响后续酶促反应。同时也利于DNA片段的充分溶解。

7  将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的中央处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent60℃预热),静置2min12,000 rpm离心1min,管底即为目的DNA片段。贮存于-20℃

   溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的片段的多少、用户对目的片段浓度要求而定。

   对溶液Eluent 65℃预热,会提高提取DNA目的片段的产量。


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