Proteinase K (recombinant), PCR grade

货号/规格：E1019-A/1 mL; E1019-B/1 mL × 5

浓度：≥ 600 U/mL (~20 mg/mL)

产品简介 

蛋白酶K是一种能够打开脂肪族、芳香族或疏水氨基酸羧基端肽键的内分解酶。蛋白酶K属于丝氨酸蛋白酶家族。本品最小可水解四肽。

产品组成

储存条件

保存于-20°C。

来源

重组毕赤酵母菌株，含有来自Tritirachium album的克隆基因。

单位定义

一个单位是指使用变性血红蛋白作为底物，在37°C下1分钟内释放出对应于1μmol酪氨酸的Folin阳性氨基酸和肽所需的酶量。在以下混合物中测定酶活性：0.08M磷酸钾（pH 7.5），5M尿素，4mM NaCl，3mM CaCl ₂和16.7mg / mL血红蛋白。

特点

• 即用型溶液

• 兼容广泛的反应条件

适用范围 

• 从鼠尾中分离基因组DNA

• 从培养细胞中分离基因组DNA

• 在从组织或细胞系分离DNA和RNA的过程中清除DNase和RNase

• 确定酶的位置  

• 改善PCR产物的克隆效率  

抑制与失活

• 苯基甲基磺酰氟和氟化二异丙基磷酸酯完全抑制该酶。

• 蛋白酶 K 不会被金属螯合剂、硫醇反应性试剂或特定的胰蛋白酶和糜蛋白酶抑制剂灭活。

注意事项

• 蛋白酶K的推荐工作浓度为0.05至1mg/mL。0.2至1%的SDS或1至4M的尿素能够提升酶活  

• Ca²⁺能够保护蛋白酶K抵抗自分解作用，增加热稳定性并能够调节蛋白酶K底物结合位点的功能  

• 在很宽的pH值范围内保持稳定：pH4.0至12.5，最佳活性范围为pH 7.5至8.0  

• 在50至55°C具有最优的活性

• 在65°C以上温度迅速发生变性

本品仅供科学研究使用。